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组织透明化试剂用于3D细胞和组织成像

2021-11-04

随着3D细胞培养在体内相关性上的提高,3D模型在药物研发中的应用越来越广泛。然而,用于3D模型的成像技术却非常有限。

康宁的3D Clear组织透明化试剂作为一种组织透明化技术,专门用于支持3D细胞培养模型的成像和基于培养板的高通量分析。本篇文章将着重介绍如何使用康宁3D Clear组织透明化试剂实现对3D细胞培养的清晰成像。


为什么3D细胞培养的成像技术有限?
由于3D细胞培养物(包括类器官和类球体)结构的厚度(通常>100 μm)及不透明性,目前的成像技术无法穿透至组织中心,只能检测到外部的2-3层细胞,图像中心区域往往呈暗色。这些外部细胞通常暴露在化合物、营养素和氧气中,无法反映整个细胞群体的状态,严重影响分析的精确性。 针对3D细胞培养的成像技术是基于传统的2D细胞培养技术开发的,对3D模型进行成像很难获得清晰度较高的图像。

使用3D Clear组织透明化试剂实现对3D细胞培养的清晰成像

Tissue Clearing(组织透明化)技术可以使组织达到光学透明,使成像更清晰。Corning 3D Clear Tissue Clearing Reagent(康宁3D Clear组织透明化试剂)作为一种组织透明化技术经过专门优化,且被验证可用于3D细胞培养模型的成像和基于培养板的高通量分析。康宁3D Clear试剂与荧光标记 (如荧光蛋白、免疫荧光、化学染料) 以及高内涵共聚焦显微镜结合使用,可实现完整的3D细胞培养模型分析以及更准确的药物筛选。


使用3D Clear组织透明化试剂的表现
综上,康宁3D Clear组织透明化试剂具有以下优点:
● 快速实现组织透明化
● 使用简便
● 无需特殊设备
● 适用于免疫荧光 (IF)、荧光蛋白 (FP) 及其他荧光标记物
● 适用于微孔板及自动化操作
● 操作可逆,可用于后续的2D H&E/IHC染色
*10mL 10X洗涤缓冲液加90mL去离子水稀释成100mL 1X洗涤缓冲液
**叠氮化钠会干扰基于辣根过氧化物酶的实验方案,但对免疫荧光标记没有影响
***DMSO (Corning 25-950-CQC)

来源:荣格-《国际医药商情》

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